《七十士譯本》的影響是巨大的。在兩約之間的時期，正如路加在使徒行傳中所說的，逼迫使猶太人分散在“天下的各國”。猶太人說各種已知的語言，而許多人不懂得他們聖經中古老的希伯來語，但大家都懂希臘語。所以，《七十士譯本》滿足了極大的需要，為分散在世界各地的猶太人提供了摩西的書卷。在耶穌降生時代，猶太人會堂所用的聖經多數是《七十士譯本》。事實上，它成為了聖經。《使徒行傳》第7章司提反在猶太人的議會裡向逼迫他的猶太人所作的見證，其中所引用的聖經即出於《七十士譯本》。埃提阿伯太監路遇腓利時，在車中所讀的就是這本書（徒八27-35）。被使徒稱為“上帝的話語”的也正是這本書。
《七十士譯本》是聖經翻譯的先驅。《中文聖經百科全書》提到這譯本時說，“《七十士譯本》的舊約聖經，在翻譯界推為獨一的巨大製作”，“這是一本破天荒的譯本，世界歷史上空前的絕作”。在舊約聖經的古代譯本中，《七十士譯本》佔了一個獨特的地位。舊約的希臘文翻譯工作是翻譯史上一項大膽的創舉。它不僅是第一個嘗試，以另一種語文來翻譯希伯來文聖經，而且就其規模和性質而言，在希臘化世界也是空前的。從社會學的角度看，它見證了古代國際之間樊籬的崩潰，以及希臘語文因著亞歷山大大帝南征北討而散播四方的事實。定居亞歷山太城這個大都會的猶太人，因著環境的緣故而被迫放棄他們的語言，但他們謹守他們固有的信仰。對猶太人來說，把他們神聖的律法翻成希臘文，無論是捍衛他們的信仰，或是滿足他們在敬拜和教育上的需要，都有著重大的意義。反過來，這個譯本也成為介紹猶太人的歷史和信仰的工具。
《七十士譯本》對後世寫作的影響。《七十士譯本》所以重要，也在於它成為早期猶太人及基督徒寫作的資源。《七十士譯本》中那些特別用來表達舊約聖經內容的 希臘文詞匯（或譯詞）影響深遠，遍及日後許多希臘文著作，其中包括斐洛和約瑟夫的著作、偽經，以及其他有關猶太人之歷史、解經、詩歌和護教等。其後，《七十士譯本》為基督徒從猶太人手中接過來，成為教會的經典，相信這是有關《七十士譯本》最重大的事情。因此，它得到廣泛的流傳，比單單囿於猶太人圈子更具影響力。《七十士譯本》是大部分新約作者的聖經。他們引用聖經，不但大多從《七十士譯本》徵引，甚至他們的作品──特別是福音書（尤其路加福音），也蘊含著許多《七十士譯本》的語句。新約中引用舊約的地方，一共350次。字句和《七十士譯本》稍有不同的地方，僅為50次。新約的神學詞匯，例如“律法”“公義”“憐憫”“真理”“贖罪”等等，都直接取自《七十士譯本》，故必須按
照它們在《七十士譯本》中的用法來理解。此外，《七十士譯本》也成為早期教父們的聖經，並因而有助他們塑造了教會的教義，例如，在與亞流主義的爭論中，雙方都從《七十士譯本》那裡尋找支持的經文（proof texts）。最後，《七十士譯本》是初期教會傳福音的有力工具；當教會需要把舊約聖經翻成其他語言時，許多時候都是從《七十士譯本》翻譯過來，而不是直接由希伯來原文譯出的。
